黄芪中有效成分的提取及不同干燥方法的研究|合理用药 - 视频兽医网论坛

只看楼主更多操作 0 发表于: 2009-10-19

本研究以中药材黄芪为试验材料，首先确定了黄芪多糖和黄芪皂甙含量测定的方法，并分别进行了黄芪多糖和皂甙提取工艺的参数的优化，然后比较了鲜黄芪干燥的不同方法，最后将提取所得的黄芪多糖进行了分离检测。主要试验结果如下： 1黄芪中有效成分含量测定方法的建立。总糖含量的测定采用苯酚一硫酸法，还原糖含量的测定采用3,5-二硝基水杨酸比色法，多糖的含量采用总糖与还原糖的差值表示：测定黄芪皂甙的含量采用香草醛-冰醋酸法。 2黄芪多糖提取工艺的研究。首先通过传统热水法提取黄芪多糖工艺的试验，得出该法最佳工艺为：粉碎度为40目，液料比值为20，提取时间2h，于100℃提取2次，所得黄芪多糖的平均含量为9.45％；由于纤维素酶在提取过程中能有效的促进多糖物质的溶出，进行了纤维素酶法提取黄芪多糖的研究。运用响应面法，通过Box．Behnken组合设计试验，利用Design Expert 7.0.3软件对试验数据进行多元回归拟合，回归方差分析显著性检验表明，纤维素酶法提取黄芪多糖工艺的优化方案是酶解pH值为4.0，温度为56.5℃，加酶量为61U/g，其多糖的平均含量达到20.31％，提取效果显著提高，所得模型回归显著，模型的R<'2>=0.9962，模型与实际试验拟合较好，自变量与响应值之间线性关系显著，可用于黄芪多糖，酶法提取试验的理论预测。各因素经回归拟合后，选择对响应值(多糖含量)显著的各项，得到纤维素酶法提取的黄芪多糖含量对编码自变量(酶解pH值、温度和加酶量)的二次多项回归方程为： Y=20.0042+0.46775X<,1>0.20663X<,2>+0.158625X<,3>+0.01025X<,1>X<,2>+1.47025X<,1>X<,3>+0.593X<,2>X<,3>-2.0111X<,1><'2>-1.48085X<,2><'2>-1.17485X<,3><'2>。根据回归方程制得不同因子的响应面分析图及等高线图。 3 黄芪皂甙提取工艺的研究。确定了提取黄芪皂甙的最佳工艺参数，试验表明采用乙醇体积分数为80％，液料比值为20，提取时间1．5h进行提取时，皂甙提取含量最佳。 4 鲜黄芪不同干燥方法的比较。通过试验研究发现，鲜黄芪采用不同的干燥方法所得的有效成分含量也不同，真空冷冻干燥方法能够最大限度的保持鲜黄芪的有效成分的含量。 5 黄芪多糖的分离纯化。黄芪多糖提取液浓缩后用sevag法除蛋白，再用蒸馏水透析，经醇沉后的黄芪多糖，冻干后备用。先进行DEAE．Sepharose Fast Flow离子交换层析，再做Sephadex G-200凝胶柱层析，然后将所得组分进行高效液相色谱检测。