胚胎保存
(一)常温保存 在15～25C下，只存活10～20h。通常采用含20％犊牛血清的PBS保存液，可保存胚胎48h。
(二)低温保存 在0～10℃下，胚胎细胞分裂暂停，代谢减慢，能保存数天。目前低温保存广泛采用改良的杜氏磷酸缓冲液(PBS)，其优点是pH稳定。保存适宜温度为：山羊、小鼠5～1012；兔1012；牛0～6℃。
(三)冷冻保存 在干冰(—79E)和液氮(—196℃)中保存。分以下几种方法：
1．逐步降温法 存活率高，但操作复杂。
(1)胚胎采集及鉴定。选择合格的桑椹胚或囊胚在含有20％犊牛血清的PBS中冲洗两次。
(2)加入冷冻液。在室温(20～25℃)分三或六步，』D人不同浓度的甘油(最终浓度1．4m01)，分步平衡5～10min。
(3)装管和标记。装入塑料细管、封口、标记(供体号；编号、数量、等级、冷冻日期)。
(4)冷冻和诱发结晶及贮存：在冷冻仪中，先以1—3℃／min的速率从室温降至—6一—712，在此温度下诱发结晶，-平衡10min，然后以0．3℃／min的速率降至—35—38℃，之后投入液氮中长期保存。
(5)解冻。在25—37℃水浴中进行。
(6)脱除抗冻剂。解冻后胚胎按进入冷冻液时的相反甘油浓度，从高向低分3次或6次进行，每步5～10min，最后将胚胎用不含抗冻剂的20％血清PBS冲洗3～4次，彻底脱除抗冻剂；或将解冻后的胚胎放人0．5mol或1．0mo!的蔗糖溶液中平衡约10min，再将胚胎在不含抗冻剂20％血清PBS中清洗3～4次。
2．一步细管法 即在细管内用非渗透性蔗糖溶液一步脱去抗冻剂的方法。简单易行。
