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如何评价圆环苗?

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如何评价圆环苗?

    据统计,目前在国内上市圆环苗的厂家共18家。南京农业大学教授姜平向农财宝典新牧网记者介绍,国产圆环灭活苗专利已经进入第二轮转让,近期还将有11个厂家的灭活苗、2家杆状病毒表达的亚单位疫苗进入市场。届时将有31个厂家的PCV2疫苗(圆环苗)产品竞争。另有消息称,梅里亚和硕腾的进口圆环苗也在申报国内注册。但由于国内圆环疫苗评价标准还未成熟,厂家宣传的产品标准也不一样,许多养户表示很难选择。
  《农财宝典》广东圆环疫苗市场调查报告数据显示,绝大多数养户认为,理想的圆环苗应该是能提高仔猪的健康程度,并且令育肥猪的生长速度加快。英德市金旭畜牧有限公司曹场长表示,他们场在选择圆环苗时,主要就是看效果。他们会拿出2-3批猪(1000头左右),进行免疫效果的对比试验,比较抗体水平和生产成绩后作出选择。
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研究员刘长明介绍,目前一些大场都会在选择圆环疫苗时做一些生产性能的对比试验。打疫苗和不打疫苗,分组免疫不同厂家疫苗,然后对比生产数据,包括料肉比、出栏时间等,然后根据数据进行选择。这需要非常详细的生产记录,一般管理环节比较薄弱的小规模猪场可能比较难做,可参考附近区域的示范场来选择。
  不能迷信TCID50
  有效抗原含量是衡量疫苗质量的一项基本内容。对于全病毒疫苗来说,半数组织细胞感染量(TCID50)是表达病毒量的指标之一,产品说明书上都会标明TCID50的滴度,厂家在宣传上也会围绕这个数量级做文章。
  对此,姜平认为,TCID50不能绝对地反映疫苗的免疫源性,用最小免疫剂量来衡量更科学。
  刘长明也认为,TCID50只能评价疫苗半成品状态下的病毒滴度,在灭活过程中可能会出现抗原含量降低、失活等情况,对于成品质量评价没有直接意义,只能作为参考。
  浙江大学动物科学院邢钢博士介绍,疫苗质量的评估主要分为半成品(灭活前)抗原含量的检测和成品抗原含量的测定。通常使用TCID50IFAIMPM)、RT-PCR、蛋白含量等方法进行标定。其中采用TCID50的方法进行评价的时候,由于不同种毒在不同细胞系上面的感染率差别很大,普通PK细胞感染率在20%-30%,但使用克隆化的细胞感染率可达到90%以上。因此TCID50不能作为通用的标准来衡量抗原含量,疫苗生产过程中标准也不尽相同,有的甚至相差200倍。
  对于成品抗原的测定方法,邢钢向农财宝典新牧网记者介绍,主要集中在与抗原性直接相关的Cap蛋白含量标定上。可采用的方法有胶体金快速检测试剂盒以及双抗体夹心ELISA法。检测之前,需要对已经乳化的疫苗进行破乳处理,提取目标蛋白。双抗体夹心ELISA法是以Cap标准品制作标准曲线,然后将不同疫苗的检测结果进行对比,分析有效抗原含量。他认为标准曲线法是比较公认的能够反映疫苗质量的标准之一。于亚单位疫苗也是以Cap蛋白的含量来评价抗原含量。刘长明介绍,Cap蛋白含量虽然可通过电泳进行相对准确的测定,但重组蛋白也存在失活和变性的问题,目前只能测出总的蛋白含量,并不能对蛋白的免疫活性进行区分。
  测抗体水平是成品疫苗质控标准
  刘长明向农财宝典新牧网记者介绍,圆环疫苗生产规范中规定的成品疫苗质控标准就是免疫阴性仔猪测抗体水平。取5PCV2阴性仔猪,间隔3周免疫两次待测疫苗,第二次免疫后2周采血测抗体效价,如抗体效价达800倍以上则视为合格产品。他表示,测抗体水平还是比较有效的疫苗评价标准,猪场也可自行操作,对比几种疫苗免疫后的抗体水平,但需要注意的是必须严格选用阴性猪做实验,否则就没有意义了。
  邢钢也建议,除了实验室检测方法,临床试验检测疫苗效果可以分析抗体水平变化。通常在14日龄、56日龄和90日龄进行抗体检测。母源抗体在仔猪出生1周左右达到峰值,6周开始降到保护线以下,分析8周龄抗体水平与抗原免疫效果密切相关。而一般推荐的圆环疫苗首免日龄在2-3周,免疫后3周产生保护效果,可避免6周龄后母源抗体降低时的感染风险。抗体水平整齐,离散度低,说明免疫效果良好。另外猪群的整齐度和死淘率等生产指标也是评价圆环苗效果的指标。
  姜平介绍了另一种评价体系,仔猪攻毒保护试验和小鼠参考疫苗检验系统。小鼠抗体免疫试验中,将免疫待检疫苗小鼠产生的抗体水平与免疫参考疫苗小鼠产生的抗体相比较,高于参考疫苗的为合格,否则为不合格。参考疫苗是指通过猪体免疫试验,检验合格的疫苗产品。他认为圆环疫苗质量检验采用仔猪攻毒保护试验,试验猪的标准有待规范和提高。刘长明解释,由于目前圆环病毒普遍存在,阴性猪比较难找,小鼠不存在圆环病毒,但对外源抗原依然会产生免疫反应,小鼠抗体水平变化与抗原含量存在相关性,也是很有意义的研究方向。

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