来源：家畜传染病学会论文资料汇编
杨 慧1 ，封 林1 ，黎 强1 ，刘德洪1 ，黄 诚2，汤 明3（1.重庆市綦江县畜牧中心,重庆綦江401420
2.重庆市动物疫病预防控制中心，重庆401147 3.重庆市农业局，重庆401121）
摘要：本文在研究仔猪口蹄疫母源抗体消长规律和仔猪口蹄疫免疫效果的基础上，探讨了口蹄疫疫苗和猪瘟疫苗不同组合免疫的相互影响。结果表明：未吃初乳前的新生仔猪体内口蹄疫母源抗体效价＜5log2，仔猪吃初乳后，其抗体水平与母猪相当（100%），此后从第7天开始下降，到35日龄时，其O型抗体效价下降到80%。仔猪断奶后阉割时免疫注射口蹄疫二价苗，到注射后28天，O型抗体的效价才达到（≥5log2）27.78%，亚I型抗体效价（≥1:22-90）29.73%。在60 日龄加强免疫口蹄疫苗后才能使抗体效价达到70%以上。在仔猪阉割时，同时分点注射口蹄疫二价苗和猪瘟苗，或者口蹄疫O型灭活苗和猪瘟苗，此二种组合与单独注射口蹄疫疫苗相比所产生的口蹄疫抗体效价在生物统计分析上没有差异。在仔猪阉割时注射口蹄疫O型合成肽苗和猪瘟疫苗，21天后口蹄疫O型抗体效价可达70%以上。
关键词：口蹄疫 猪瘟 同时免疫 效价
中图分类号：S851.35 文献标识码：B 文章编号：
口蹄疫和猪瘟都是国家规定的强制免疫疫病，为了促进防疫工作开展，提高免疫密度和质量，减轻防疫人员工作强度，我们进行了不同口蹄疫疫苗与猪瘟疫苗分组分点注射的免疫试验，现报告如下：
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 猪口蹄疫O型合成肽疫苗（简称口蹄疫合成肽苗，下同）：农业部定点***生物药厂生产，批号0604001。
1.1.2 口蹄疫O型-亚洲I型二价灭活疫苗（简称口蹄疫二价苗，下同）：农业部定点***生物药厂生产，批号051106。
1.1.3 猪口蹄疫O型灭活疫苗：农业部定点***生物药厂生产，批号060320。
1.1.4 猪瘟细胞苗（简称猪瘟苗，下同）：农业部定点***生物药厂生产，批号0604149-1。
1.1.5 猪瘟三联苗：农业部定点***生物药厂生产，批号0604066-2。
1.1.6 口蹄疫亚I液相阻断ELISA试剂盒：中国农业科学院兰州兽医研究所，批号2006083102。
1.1.7 猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA试剂盒：上海优耐特生物医药有限公司生产，批号200608003。
1.1.8 口蹄疫IHA抗原：批号061104，阳性血清批号060520，中国农业科学院兰州兽医研究所生产。
1.1.9 猪瘟IHA抗原：批号061029，阳性血清批号060209，中国农业科学院兰州兽医研究所生产。
1.1.10 试验猪：我县某规模化猪场母猪所产仔猪，240头,经检查健康正常,随机分组。
1.2 方法
1.2.1 试验分组：用于试验的仔猪均在35日龄阉割，按以下分组并在此时注射疫苗。
1.2.2 试验猪检测抗体采血方法、时间:通过耳静脉或前腔静脉无菌采集血样，分离血清，冷冻保存备用。分别采集刚产仔母猪血样，所产仔猪吃初乳前血样和吃2次初乳后血样，以及此后第7、14、21、28、35日龄时的血样，检测母源抗体。试验组仔猪1—7组都在注射口蹄疫疫苗后21天采集试验猪血样检测抗体。第8组在35日龄首次注射口蹄疫二价苗后笫7、14、21、28天分别采血检测抗体；60日龄再注射口蹄疫二价苗后第21、30、70、130天，分别采血测抗体。
1.2.3 检测方法:口蹄疫亚I抗体检测用液相阻断ELISA法，口蹄疫O型抗体检测用正向间接血凝试验（标准NY/SY 150-2000），口蹄疫VP1结构蛋白抗体检测用口蹄疫VP1结构蛋白抗体ELISA法，猪瘟抗体检测用正向间接血凝试验（标准NY/SY 156-2000）。具体操作按照试剂盒说明书进行。
2 试验结果
2.1 1日龄内仔猪吃初乳前后口蹄疫母源抗体实际检测结果（见表1）
从表1可知：在母猪体内口蹄疫0型抗体水平≥7log2、亚洲I型抗体水平≥1:128的前题下，其仔猪在吃初乳前的抗体水平经检测分别在＜5log2和≤1:16以下，吃初乳后的1日龄内仔猪，其口蹄疫0型抗体水平上升到≥7log2占100%、亚洲I型抗体水平上升到1:128占30%，说明仔猪O型母源抗体水平与母猪体内抗体水平相当，而亚洲I型略低于母猪。
2.2 仔猪口蹄疫母源抗体的消长结果（见表2）
从表2可知：仔猪在7日龄内口蹄疫0型母源抗体一直保持高水平（≥7log2），7-14日龄时处于保护水平效价之上的仔猪数下降至70%，14-21日龄下降至25%，21-28日龄下降10%，35日龄时为0，但在35日龄时仍有80%上的仔猪抗体效价达到国家规定的检查水平（≥5log2）；亚洲I型母源抗体50%保护率（1：22-90）1日龄为70%，7日龄下降至40%，14日龄下降至35%，21日龄下降至15%，28日龄时为0。
2.3 35日龄阉割仔猪时注射口蹄疫二价苗和60日龄时加强免疫注射口蹄疫二价苗后免疫抗体产生情况（见表3）
从表3可知：35日龄阉割仔猪时注射口蹄疫二价苗2ml/头，注苗后第7、14、21、28天时的O型抗体合格率（≥5 log2）分别为0%、10.53%、27．78%、27．78%，60日龄二次免疫后第21天时，抗体合格率达到100%。亚洲I型抗体在注苗后第7、14、21、28天时的50%保护率分别为0%、21.05%、25.71%、29.73%；99%保护率分别为0%、2.63%、2.86%、2.70%，60日龄二免后第21天时，抗体99%保护率（1:128）为70%。
2.4 阉割仔猪时按照分组要求，免疫注射口蹄疫苗与猪瘟苗不同组合后亚I型和
O型免疫抗体检测结果分别见表4和表5：
从上表可知：各组之间的口蹄疫亚洲1型50%抗体保护率（1:22-90）从高到低依次为2组＞5组＞3组＞4组＞6组，经生物统计分析， 2与6组间差异显著（P＜0.05），其余组与组之间差异不显著（P＞0.05）； 99%抗体保护（≥1:128）率依次是6组＞4组＞2组＞3组＞5组， 经分析2与6组间差异极显著（P＜0.01），3与6、5与6组间差异显著（P＜0.05），其余组间差异不显著（P>0.05）。
从表5可知：各组之间的口蹄疫O型抗体效价（≥5log）从高到低依次为7组＞2组＞1组＞4组＞3组＞组6＞5组。经统计分析3组、4组、5组6组与7组间的差异都极显著（P＜0.01），1组、2组与5组间均有显著性差异（P＜0.05），其余各组之间的差异不显著（P＞0.05）
2.5 对1－7组实验猪按照实验设计免疫后，于第21天采集血样分别进行VP1结构蛋白抗体检测，结果如表6。
2.6 仔猪60日龄加强免疫口蹄疫二价苗后抗体消长情况(见表7)
从检测结果可知：用口蹄疫二价苗二免后30、70、130天时的O型抗体阳性率分别为100%、100%和75%，亚洲Ⅰ型抗体保护率分别为75%、75%和50%，均比一免后有了显著的提高。
2.7 实验组按照实验设计免疫后21天检测猪瘟抗体结果如表8。
从表7可知：猪瘟免疫抗体保护率(5log2）2组＝3组＞6组＞1组＞7组＞5组。经生物统计分析，1.2.3组和6组间差异不显著,5组与其他各组差异均极显著。
3 讨论
3.1 在母猪口蹄疫0型抗体效价≥7log2、亚洲I型抗体效价≥1:128的前题下，所产仔猪在吃初乳前的抗体分别为＜5log2和≤1:16以下，说明胎儿经胎盘获得母源抗体能力极为有限，而在经2次吃初乳后，其口蹄疫0型抗体迅速上升到≥7log2、亚洲I型抗体已有30%的仔猪达到了1:128，其抗体水平几乎与母猪相当，此种生理现象为开展母猪口蹄疫苗超前免疫提供了依据,同时己说明初生仔猪应快吃初乳,避免保护空挡期。
3.2 试验结果表明：母猪在经过口蹄疫免疫后,所产仔猪在7日龄内，其口蹄疫O型母源抗体均处于保护水平之上（≥7log2），其后开始陆续下降，到35日龄时仍有80%的仔猪处于国家规定的检查标准之上。而亚洲I型母源抗体在1日龄时有70%的仔猪处于50%的保护水平，此后迅速下降，到28日龄时，已下降为0。此结果说明，只要作好母源免疫，其所产仔猪在35日龄内基本可以免受O型口蹄疫病毒感染或者不发病，同时考虑到口蹄疫疫苗均为灭活疫苗，受母源抗体干扰较小，因此，选择35日龄进行口蹄疫首次免疫是科学的,既可避免保护空挡期,也可使猪产生较好保护力,同时结合仔猪阉割一并进行,达到减少工作量的目的。
3.3 仔猪在35日龄被阉割时注射口蹄疫二价苗，到第7日龄时，还检测不到抗体，到第14日龄时才能检测到抗体，到21日龄时，O型抗体的效价达到5log2及以上的仅为27.78%，亚I抗体效价稍高，达29.73%。60 日龄加强免疫后21天，O型和I型抗体达到保护水平的分别达90%和70%。此结果一方面表明猪使用牛羊用二价苗是可行的;另一方面表明仔猪首免口蹄疫二价苗后，要14天才能产生免疫效果；给仔猪免疫一次疫苗，抗体水平远远达不到农业部规定的标准，也不能使猪免于感染，须进行加强免疫，才能达到理想的保护水平。
3.4 仔猪在35日龄被阉割时，无论是单独注射口蹄疫二价苗2ml，还是被分点同时注射猪瘟疫苗1头份和口蹄疫二价苗2ml，或者同时注射口蹄疫二价苗2ml和猪瘟三联苗1头份，其产生的口蹄疫亚Ⅰ型抗体水平经生物统计分析，均无差异。说明在仔猪阉割时，同时分点注射猪口蹄疫二价苗2ml和猪瘟疫苗或三联苗1头份，均不影响亚洲Ⅰ型免疫抗体。尽管注射4ml/头口蹄疫二价苗，其产生的亚Ⅰ抗体水平高于注射2ml/头组，但由于剂量加大一倍，成本也增加一倍，副反应也增大，因此不宜选用。
一次同时分点注射口蹄疫二价苗2ml和猪瘟苗1头份组或口蹄疫O型苗2ml、猪瘟苗1头份组，所产生的口蹄疫O型抗体水平较高，除合成肽苗组外，其余各组口蹄疫O型抗体水平生物统计分析，差异均不显著，说明在仔猪阉割时同时分点注射猪瘟疫苗、口蹄疫O型苗或二价苗，不影响O型抗体产生。此外，口蹄疫多肽苗所产生的O型抗体较高，但由于该苗是一人工合成肽，检测的IHA抗体不代表中和抗体水平，其保护力如何，还有待进一研究。
3.5 试验结果表明：用ELISA方法检测1-7组口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体，其结果与用IHA方法检测的O型抗体相比，无论是效价的高低，还是各组间的差异，均基本一致。
3.6 35日龄仔猪在注射口蹄疫二价苗2ml后, 于60日龄加强免疫注射口蹄疫二价苗2ml。二次免疫后第21天时，O型抗体抗体合格率达到100%,亚洲I型抗体在99%保护率（1:128）为70%。口蹄疫二免后130天时O型抗体保护率为75%、亚州Ⅰ型抗体保护率为50%，说明经二次口蹄疫二价苗免疫的生猪其O型抗体有效保护期在4个月以上。同时也能得到较好地保护生猪免受亚洲Ⅰ型口蹄疫的侵袭。此时肉猪基本出栏。
3.7 口蹄疫二价苗2ml、猪瘟苗1头份免疫组和猪瘟苗1头份、10天后注射口蹄疫二价苗2ml免疫组的猪瘟免疫抗体保护率最高，口蹄疫二价苗2ml、猪瘟三联苗1头份免疫组的猪瘟免疫抗体保护率最低。据此结果：从既能减少工作量又能达到最好保护的角度选择其猪瘟的免疫程序，应首选口蹄疫二价苗2ml、猪瘟苗1头份的免疫程序。
4 小结
4.1 新生仔猪未吃初乳前，其体内口蹄疫母源抗体极少，经吃2次初乳后，其抗体水平与母猪相当，此后从第7天开始下降，到35日龄时，其O型抗体合格率已下降到80%，此时正适合进行口蹄疫免疫，而35日龄正是阉割仔猪的时间，因此二者可同时进行。
4.2 给仔猪注射口蹄疫苗后，须14天才能产生抗体，到28日龄时，O型抗体的效价达到5log2及以上的仅为27.78%，亚I型抗体效价达50%保护的为29.73%。须在60 日龄加强免疫后才能使抗体合格率达到70%以上。
4.3 在实际防控工作中，根据情况可选用下列三个免疫程序之一来预防口蹄疫和猪瘟病，即：在仔猪阉割时，同时分点注射口蹄疫二价苗和猪瘟苗1头份；或者口蹄疫O型灭活苗2ml和猪瘟苗1头份；或者口蹄疫合成肽苗与猪瘟疫苗各1头份，间隔60天时再注射首免时相同的口蹄疫疫苗2ml。
参考文献：
[1] 李金海，张东，文萍萍，等.同时注射口蹄疫和猪瘟疫苗对免疫效果的影响[J].四川畜牧兽医，2008，35(5)：24-25.
[2] 王道坤.七大疫苗问题影响免疫效果[J].畜牧市场，2008，(50：51-52。
