一、MD诊断依据
MD是高度接触传染性的，在商业鸡群中几乎是无所不在，但在感染鸡中仅有一小部分发生MD，此外，接种疫苗的鸡虽然能得到保护不发生MD，但仍能感染MD强毒，因此是否感染MDV不能作为诊断MD的标准。
主要依据临诊症状和病理变化。血清学和病毒学方法可用于鸡群感染情况的监测，但不能作为发生MD的诊断依据。
二、鸡群MDV感染情况的监测
一般采用琼脂扩散的血清学方法，检测鸡血清中的MD特异抗体或鸡羽髓中的MD抗原。
目的：
1 熟悉鸡马立克氏病的诊断方法
原理：
可溶性抗原与相应抗体结合（在半固体琼脂中）后,在适量电解质存在下，经过一定时间形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。
材料与试剂
8%NaCl琼脂平板、打孔器、针头、加样枪、枪头、生理盐水
马立克标准阳性血清、马立克标准琼扩抗原、待检羽髓
操作方法
(1) 打孔：用打孔器对琼脂平板打孔，中央打1个孔,周围再打6个孔（孔径4mm，孔距3mm），形成梅花形图案。
(2)用针头挑出孔内琼脂,注意不要挑破孔缘。
(3)封底：在火焰上缓缓加热，微微烫即可。使孔底边缘的琼脂少许熔化以封底，以免加样后液体从孔底渗漏。
(4)加样：在中央孔加MD阳性血清，向周边1、4孔加标准MD琼扩抗原，2、3、4 5孔加待检羽髓浸液（加数滴生理盐水在EP管内挤压，浸泡）。6孔加生理盐水每孔约加50μl，以加满为度。
(5)加完后，盖上平皿盖，置湿盘中，在37℃下自由扩散24小时。
结果判定
被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线，并与周边已知抗原的沉淀线互相融合者，判为阳性；不出现沉淀线的判为阴性。
注意事项
1） 在平皿上贴好标签,防止弄混。
2） 挑琼脂时注意不要挑破琼脂边缘。
3） 一定要封底。
4） 加样时,注意不要产生气泡,以加满为度,否则影响反应结果。
5） 每加完不同的样后要更换枪头，以免造成污染。
